摘要: 马蜂毒确有直接杀伤肿瘤细胞的作用，其机理可能由于马蜂毒具有抑制细胞分裂作用, 肿瘤细胞不能分裂增殖而受到抑制。

　　关键词: 　马蜂毒 　S180小鼠肉瘤瘤株

　　癌症是危害人类健康最严重的疾病之一, 至今, 没有理想的治疗药物。

　　动物毒素为自然界重要资源之一, 其在医药领域中的应用价值亦日益为人们所重视, 其中蜜蜂毒已被用来治疗关节炎、风湿痛、坐骨神经痛、牛皮癣、疟疾、多发性硬化等多种疾病, 对爱滋病的疗效也在研究中, 与蜜蜂同为膜翅目的马蜂毒种类繁多, 其毒素差异极大。 　　

马蜂毒具有显著的药理作用, 有抑制细胞分裂和免疫调节作用, 并有多种抗类风湿作用、探讨马蜂毒杀伤抑制肿瘤细胞作用, 对肿瘤的临床治疗具有重要的理论和应用价值。

　　1 　材料和方法

　　S180小鼠肉瘤(腹水型)瘤株由沈阳药科大学引进。马蜂毒:亚非马蜂和陆马蜂, 通过电刺激法采集蜂毒，中科院动物所提供。

　　蜂毒作用于S180瘤细胞的方法和浓度 　共分三种不同浓度蜂毒, 即: (1)组: lmg蜂毒+ S180腹水1ml ; (2)组0. 5mg蜂毒+ S180腹水lml ; (3)组0. 01mg蜂毒+ S180腹水lml。各组均于 37℃, 5%二氧化碳中温育30分钟, 生理盐水洗三次, 2000rpm离心, 沉渣加lml生理盐水稀释,备用。

　　瘤细胞接种 　将不同浓度马蜂毒作用过的S180瘤细胞分别腹腔接种于昆明鼠；

　　lmg马蜂毒组 　将lmg浓度马蜂毒作用过的S180瘤细胞0. 2ml/只 腹腔接种于昆明鼠共30只。

　　0. 5mg马蜂毒组 　将0.5mg浓度马蜂毒作用过的S180瘤细胞0. 2 ml/只 腹腔接种于昆明鼠30只。 　　

0.01mg马蜂毒组 　将0.01mg浓度马蜂毒作用的S180瘤细胞0.2ml/只 腹腔接种昆明鼠30只。

　　对照组 　接种未经马蜂毒作用过的S180腹水0.2ml/只,共30只。

　　各组鼠于同样条件下饲养, 观察腹水产生情况, 记录死亡时间或长期生存(60天以上)只数。

　　2 　结果

　　表1 　　　马蜂毒对肿瘤细胞杀伤作用观察表
　　项 目 　　　　动物数 　　　　平均值土SD 　　　　T检验 　　　　P
　　1mg蜂毒组 　　30 　　　　　54.6士11.38 　　　9. 8904 　　　　< 0.01
　　0. 05mg 　　    30 　　　　　 26.50士7.82 　　　 3.1433 　　　　< 0.01
　　0. 01mg 　　　 30 　　　　　 24.80土4.04 　　　 8.5983 　　　　< 0.01
　　对照组 　　　   30 　　　　　 18.50士1.90 　

　　注: 癌细胞为S180小鼠肉瘤 (腹水型)。长期生存鼠生存期按60天计算。

　　lmg马蜂毒组 　小鼠腹腔接种马蜂毒, 作用30分, 并经生理盐水3次洗过的S180瘤细胞, 注后当时小鼠不活跃, 静止不动, 半小时后恢复正常。连续观察实验鼠腹部情况。实验鼠腹部绝大部分均未见增大, 仅2只鼠于接种后3天死亡, 较对照组均值生存时间延长15天。其余8只实验鼠长期生存(超过60天), 生存期平均为54.6天, 与对照组比较差异显著, P < 0. 01。

　　0. 5mg马蜂毒组 　每ml S180新鲜腹水加0. 5mg马蜂毒, 37℃温育30分钟后, 生理盐水洗3次, 用生理盐水恢复原体积, 立即腹腔接种昆明鼠, 注射当时, 小鼠不活跃。静止不动, 约半小时后恢复正常。观察腹水增多情况。腹水增加较对照组显著缓慢。生存期显著延长, 平均生存期26. 50天。与对照组比较差异显著, P < 0. 01。

　　0. 0lmg马蜂组 　该组为极小马蜂毒组。方法同(1)、(2)组。腹腔接种后, 无任何腹腔刺激症状, 活动正常。腹水增加缓慢,生存期较对照组明显延长, 为25.8天。与对照组比较, 差异显著, 说明马蜂毒极小剂量即有效。

　　对照S180 新鲜腹水未经任何处理, 0. 2ml接种昆明鼠腹腔。腹水迅速增加, 无一例外均死于肿瘤。 　　　

　　3 　讨论

　　马蜂毒的直接杀伤肿瘤细胞作用 　由实验结果证明: 马蜂毒确有直接杀伤肿瘤细胞的作用, 其机理可能由于马蜂毒具有抑制细胞分裂作用, 肿瘤细胞不能分裂增殖而受到抑制。

　　本实验进一步证明S180瘤细胞接种小鼠腹腔后, 小鼠未长腹水。而且长期存活, 肿瘤细胞不仅失去增殖能力, 而且失去生存能力, 已死亡, 这为进一步研究马蜂毒治疗肿瘤开辟了喜人的前景 。 　　

　　马蜂毒杀伤肿瘤细胞的计量和时间 　由本实验提示: 马蜂毒lmg /ml , 半小时, 可彻底杀伤肿瘤细胞；0. 5mg/ml , 半小时可显著延长小鼠生存期；0. 01mg/ml马蜂毒可以很明显延长作用时间, 可能继续降低马蜂毒的浓度。实验证明极低的马蜂毒作用即可明显延长小鼠生存期。　　

　　马蜂毒对小鼠腹腔有一定刺激性, 表明在小鼠腹腔注射后, 活动减少。但半小时后, 即恢复正常，说明这种刺激性, 短时间可以缓解。　　

　　4 　结论 　　

　　马蜂毒对肿瘤细胞具有杀伤作用, 这种杀伤作用与马蜂毒的计量和作用时间有关, 经马蜂毒处理过的肿瘤细胞(S180 )失去了再接种致瘤作用。极低浓度的马蜂毒处理的肿瘤细胞即可显著延长小鼠的生存期。由此可见, 对马蜂毒的研究开发是极有必要而前景可观的。


　　中医药学刊 　　2005年5月第21卷第5期

　　1 . 辽宁省肿瘤研究所细胞生物研究室 　孙铁民 　梁 伟 　张启明 　金 雨
　　2 . 沈阳市苏家屯卫生防疫站 　　傅 瑶
　　3 . 中科院动物研究所（北京∥第一作者 男 1963年生 助理研究员) 李铁生